春天的回忆3 美国篇/San Diego 1

Steven Li

講述一個初中68届的「知識青年」，其奋斗、拼搏的人生經歷！ 2005年3月底我乘東方航空的班機，第二次飛越太平洋來到美國，而此刻的我已經是52歲的知命之年，來到異國他鄉開始了人生新的旅程。那一天我不得已上路为不安分的心为自尊的生存为自我的证明路上的辛酸已融进我的眼睛心灵的困境已化作我的坚定在路上用我心灵的呼声在路上只为伴着我的人在路上是我生命的远行在路上只为温暖我的人 　　1994年8月，我随中国进出口公司组织的代表团初次踏上大洋彼岸的美國，访问考查座落在德州达拉斯的FORNEY公司。在当时该公司有一个系统被国内大电站广泛应用，那就是锅炉FSSS安全保护燃烧器管理监控系统。 孤独是一种宿命，孤独，无处不在。 　　代表团一行10多人，非常荣幸的访问参观了洛杉矶、旧金山、西雅图、达拉斯、费城，纽约、华盛顿……等城市。 當時的待遇還真不錯，住、食、行均有專人安排與接待，每天有一定的美金補助。 　　在访美旅程中，我們住過hotels, Guesthouses, Motels以及华人的家。當時看到美国小镇上的人们几乎都住在house里，而且有一个backyard，给人一种很温馨的感觉，美国人的家里几乎都会养一两只宠物，家里的狗和猫都很温顺，牠們是美國家庭組成的一部分。這是我當時對美國最基本的印象之一。 　　以前在美国大片里，似乎这个国家里的一切都被冠以繁华、伟大、高不可攀……但是真实的美国梦其實很朴实、很简单，却又富有豐富的内涵。當然，這些感触都是以后到美國正式生活后，才有更深刻的認識與體驗。 　　這是離開上海前的合影照，左起分別為外甥女婿、外甥女、我、南京好友方劍波一家，方先生一家專程從南京駕車到上海為我饯行。 　　2005年3月我从上海浦东国际机场出发，经过10多小时的飞行抵美国洛杉矶国际机场，然后开車两个小时左右抵达圣地亚哥的家。 圣地亚哥是一个具有现代化的都会风貌的城市，是一个风景非常优美的海边古城，在加州南部，面向太平洋，拥有美丽的海滩，森林和山脉，其城市面积330平方公英里，都市人口120万，这里阳光明媚，冬暖夏凉，春季凉爽偶雨，夏季艳阳高照，秋季晴朗舒适，冬季虽多雨但毫无寒意，海湾崎岖，风景优美，是美国最受欢迎的度假圣地，许多人都认为圣地亚哥是美国最迷人的城市。      圣地亚哥位于美国西海岸，是加州南部唯一天然良港，而停泊在港湾远航归来的航空母舰更是给港口增添了美与活力！ 圣地亚哥是一个具有现代化的都会风貌的城市，是一个风景非常优美的海边古城，在加州南部，面向太平洋，拥有美丽的海滩，森林和山脉，其城市面积330平方公英里，都市人口120万，这里阳光明媚，冬暖夏凉，春季凉爽偶雨，夏季艳阳高照，秋季晴朗舒适，冬季虽多雨但毫无寒意，海湾崎岖，风景优美，是美国最受欢迎的度假圣地，许多人都认为圣地亚哥是美国最迷人的城市。南加州几乎代表完美的天气，美丽的海滩和友善放松的环境，而圣地亚哥简直就是天堂，在这个受欢迎的天堂里有理想的气候，了无边际的沙滩，深海港口，和各种让人流连忘返的别具一格的商店，餐馆和文化景点，整个城市都在棕榈树和鲜花的掩映下，颇具热带风光，城市的建筑风格精致而漂亮，鳞次栉比，各具特色，既古朴又现代。即使你漫步在沿山而建，崎岖蜿蜒的居民区里也会被它的美丽整洁而吸引，使你感觉到整座城市就如同一个大花园。因此它被誉为是世界上最舒适的地方之一。 — 這是我在San Diego的家 —这个世界，看似周遭嘈杂，各色人等，泥沙俱下，本质上，还是你一个人的世界。你若澄澈，世界就干净；你若简单，世界就难以复杂。你不去苟且，世界就没有暧昧。你没有半推半就，世界就不会为你半黑半白。你简单，世界对你就简单。 　　这个世界上最美的风景，不是春天的风，夏天的树，秋天的叶，冬天的雪，而是我和你四目相对，在彼此的眸光中闪烁的依恋……。 聖地牙哥地標之經典又浪漫的勝利之吻，勝利之吻或稱世紀之吻，是1945年8月14日第二次世界大戰期間，發生在紐約時代廣場，當時日本宣布無條件投降，紐約民眾紛紛走上街頭慶祝勝利。一位美國水兵，在時代廣場的慶祝活動中，隨機親吻了一位穿著白衣的女護士，這一瞬間被生活雜誌的攝影師Alfred Eisenstaedt拍了下來，成為日後相當傳奇的經典歷史畫面。 　　多时候，仰望星空，自己问自己这些个梦将要做多久，这些梦什么时候才能结束。自己也不知道自己就这样一路追下去，什么时候是尽头。每个人在年少的时候，真的无所畏惧，一路追梦前行，不管路途是平坦还是崎岖。或许，有梦的地方就能撑起那片湛蓝的天，但畢竟我己是52歲高齡之人啊。 從末開過車的我，在太太的指導與訓練下，盡可能的熟悉駕車技能與熟悉道路，在短短的三個月里我完成了筆試、路考后成功的拿到了美國駕照，圖中的兩部車是我先后使用的車輛。 　　人生以放牧自己的云彩为荣，並将落地成泥成为种子，钟情一成不变的努力与奋斗！ 第二次到美國后，我深深的知道我的一切必須從零起步，國內所有的榮譽與成功已經全國清0⃣️，我在美國這塊土地上，僅剩的只是一個52歲的中國老人，想實現人生再次起飛的夢想與願望。 感謝我的太太Jia，感謝我的導師與單抗啟蒙者Dr. Shi，在他（她）們的幫助與指導下，我走上了單克隆抗體制備之路。我以后在这个领域（Hybridoma)所取得的一切成功，在客观上全部源于Dr. Shi的訓練與嚴格要求。 從3月底到美國，當年8月入職我的第一份工作的ProSci公司。在這5個月里每天晚上跟隨史教授工作到凌晨，完全在其的嚴格教導與訓練下，成為史老師非正式的最後一名關門弟子。 借以此文衷心感謝我的恩师Dr. Shi，也感谢我的太太给予我各方面的关心与支持。🙏🏻🙏🏻 杂交瘤技术原理 单克隆抗体由单一B淋巴细胞分泌得到，但B淋巴细胞在体外不能长期存活（最多两周），因此无法制备单一B淋巴细胞群，也无法进行单抗的大量生产。骨髓瘤细胞不具备分泌抗体的能力，但是可以在体外培养条件下无限繁殖。将免疫B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，得到的杂交细胞具有双亲细胞的遗传特性，既能像B淋巴细胞一样分泌抗体，又能像骨髓瘤细胞一样无限增殖，成功克服了B淋巴细胞在体外存活周期短的问题。对杂交瘤细胞进行培养，即可得到单克隆抗体。      如果背朝阳光，前面总有或长或短的影子；而当你面向阳光，虽然阳光有点刺眼，但阴影却永远被甩在了身后。步履再艰难，再迟缓，但只要不停止不言弃，即使最后无法抵达终点，也同样可以享受和领略沿途美好的风景。 杂交瘤制备单克隆抗体流程圖 目前，单克隆抗体已广泛地应用于传染病、肿瘤以及自身免疫性疾病等领域的治疗中，并显示出不错的治疗效果和广阔的应用前景。 在抗病毒领域，单克隆抗体主要通过：抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（Antibody-dependent cell mediated cytotoxic, ADCC）、补体依赖性细胞毒作用（Complement-dependent cytotoxicity, CDC）以及抑制病毒与细胞受体的结合从而阻止其侵入细胞等作用来治疗病毒感染。 岁月是一位沉默不语的圣人，却教给了我们如何处世和独处。生命是一场无法预约的旅程：高雅如诗，美丽如雪。 杂交瘤制备单克隆抗体实验流程 利用杂交瘤制备单克隆抗体通常操作流程为：抗原制备、用抗原免疫动物、取免疫动物的脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞、对杂交瘤细胞进行筛选及克隆化、利用筛选得到的杂交瘤细胞进行单克隆抗体的大量生产。杂交瘤技术 杂交瘤技术又称为单克隆抗体技术：将免疫动物的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，下载可以得到既能产生抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞，利用杂交瘤细胞可以大量的生产单克隆抗体。细胞融合技术 细胞融合技术是杂交瘤技术的基础，通过聚乙二醇（PEG）（最常用）、电转等方法对细胞进行人工诱导，可使两个细胞通过膜融合形成单个细胞。 我在蓝天之下我的脚步在阳光下跳跃我的心情在蓝天下飞翔轻点脚尖挥臂而舞舞动在这暖色里恰似超脱了生活的本质那是蓝天与白云的亲吻亦是阳光与思绪的相交 抗体结合抗原示意图什么是单克隆抗体？ 抗体(antibody)是一种通过效应B细胞（浆细胞）分泌，用来鉴别和清除外源物质如细菌、病毒等的一种“Y”形免疫球蛋白。通常，天然抗体具有2条较长、相对分子量较大的重链（H链），以及2条较短、相对分子量较小的轻链（L链）。链间由二硫键和非共价键连接形成一个的单体分子。 按照生物学特征，整个抗体可进一步分为恒定区（C区）和可变区（V区）两部分。通常，外界的病原体拥有一个复杂的蛋白质结构，其表面存在有各种各的蛋白质，即抗原表位。如上文所说，当机体接受病原体的刺激后，体内的免疫系统就会被激活。随后，免疫系统针对病原体的不同蛋白质结构，经抗原呈递细胞传递其抗原信息，在T淋巴细胞协同下，B淋巴细胞的基因组经过一系列重组和突变后分化为浆细胞，从而分泌能特异性结合抗原蛋白的抗体。而单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）就是指由单一B细胞（其基因仅能编码一种抗体）克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。 1975年，Kohler等科学家首次通过杂交瘤技术成功获得了具有抗原特异性的鼠源性单克隆抗体，多年以后获得生物若贝尔奖，从而开启了单克隆抗体开发的新纪元。 “春光可惜莫轻抛，时代堪喜须勤奋。”这一句话，如警钟长鸣，时刻击响着心灵，震荡着我们的思想，敲打着人生前进的灵魂。立下志向行动起来，勤奋，勤奋，再勤奋，让自己的人生充满希望与快乐！ 1984年的诺贝尔生理学或医学奖被授予尼尔斯·k·杰恩(Niels K. Jerne)、乔治·j·f·Köhler和César米尔斯坦(César Milstein)，以表彰他们关于免疫系统发育和控制的特异性理论以及单克隆抗体生产原理的发现。 　　曾经有一个生命，在黑暗中撞破束缚，来到了这个光明的世界，母亲那一寸慈祥的微笑定格在那一瞬间，这一刻对于世界来说，虽然并没有多少人知道，但大地之母永远铭记着这一瞬间，我在这人世间留下了脚印，从此岸到彼岸。 产生背景 杂交瘤技术是在体细胞融合的技术基础上发展而来的，1975年，Kohler和Milstein成功把免疫小鼠的脾脏B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，形成了B淋巴细胞-骨髓瘤细胞杂合体，这种杂合体既能在体外培养中无限地快速增殖且存活，又能分泌单克隆抗体。随后，他们在英国《自然》杂志上发布了这一成果，并正式提出了杂交瘤的概念。 這張照片是年輕時期的史教授與科學家Koehler在武漢生物所親切交談有關單克隆抗體技術。 时光像一条悄悄游走了的小船，它的身影隐约在了天际里，而身后留下的浅浅的波纹，却载着我们无尽的思绪一圈一圈的荡漾远去。 Dr. Shi 与德國科學家Mr. Koehler在一起Christmas Party 2007 　　2005年8月我進入ProSci . Inc 生物科技公司工作，这个公司是由美籍华人科学家、企业家耿峪、徐丽夫妇创办的，多年来的艰苦创业，公司由小到大，发展迅速，目前在生物界己占有一定的名声与地位。 我記得我剛進公司時的迷茫與無奈，畢竟在國內從事的是電力自動化專業，而今在美國這完全陌生的環境下，却需要從事完全風馬牛不相干的生物工作。哈哈，我永遠記得就如我現在看到剛從國內來的50多歲人的眼光，但是一個生性樂觀且好強的我，暗自下決心我必須努力在Hybridoma 這領域做出成績！ 融合细胞的筛选 HAT培养基筛选技术是杂交瘤技术中另一个关键的技术，在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后，会产生多种融合结果（未融合的骨髓瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、正确融合的杂交瘤细胞），为了得到所需的杂交瘤细胞，必须利用HAT培养基对融合后的细胞进行筛选。HAT培养基的筛选原理为：DNA合成途径有生物合成途径与应急合成途径两种，HAT培养基中含有次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶核苷酸（T）等物质，氨基喋呤可以对DNA的生物合成途径进行阻断，骨髓瘤细胞会因为生物合成途径被阻断且自身缺乏应急合成途径导致不能增殖进而快速的死亡；而B淋巴细胞因缺乏体外增殖的能力，一般在10天左右死亡；杂交瘤细胞具有体外增殖能力且由于次黄嘌呤与胸腺嘧啶核苷酸的存在，可以通过应急途径合成DNA并在HAT培养基中正常生长，不会死亡。因此将融合后的细胞放于HAT培养基中培养，其他的融合结果会全部死亡，最终筛选出杂交瘤细胞。 自春风荡漾，自夏炎匆匆，自秋日思语，自冬季花红，匆匆又匆匆，一年又一年。 杂交瘤细胞特点具备抗体分泌功能保持细胞永生性      草在结它的种子，风在摇它的叶子。我们站着，不说话，就十分美好。     机场有两个地方最感人：一个登机口，一个出口。一个是不想让你走，一个是等你回来。( 女儿、女婿北京机场2012 ） 　　人生如烟，如云，如风。转瞬即逝。“只有倒退的人与车，没有倒退的时间和路”，既然我走到了今天，对于这种社会的责任，只有前进，前进，再前进！ 2006年ProSci 公司同事一起的照片。 远  方（海子）远方除了遥远一无所有遥远的青稞地除了青稞一无所有更远的地方更加孤独远方啊除了遥远一无所有这时石头飞到我身边石头长出血石头长出七姐妹站在一片荒芜的草原上那时我在远方那时我自由而贫穷这些不能触摸的姐妹这些不能触摸的血这些不能触摸的远方的幸福远方的幸福是多少痛苦 13年以后我們Prosci同事再次相聚在一起！ 如果你是一只雄鹰，就不要在乎麻雀怎么看你！因为你飞行的速度、高度、力度、角度，它看不见、看不懂！所以，人生最重要的是认识自己，知道自己的目标、方向和实力，而不要在乎别人如何议论你，努力只为看见更优秀的自己。你就很了不起了。 制备流程 利用杂交瘤技术制备单克隆抗体通常操作流程为：抗原制备、抗原免疫动物、杂交瘤细胞制备、融合细胞的筛选、培养杂交瘤细胞制备抗体。      懂，比爱更重要。爱，不一定懂。可懂你的人，不需多说，只一个微笑一声问候，便风轻云淡，踏实心安。     懂，是世界上最温情的语言。它是岁月的一种感动，如湖水知道月的冰冷，月的柔美；它是心灵的一种呵护，如微风掠过琴弦，是心的共鸣，它是生命的一道风景，如花摇曳在风雨中，却盛开在心间。     所谓"懂你"的人，并不是指对你的信息了如指掌，而是当所有人都以为你快乐的时候，只有她知道你笑容背后的感伤与坚强！      每个生命都有它们存在的价值，每个生命都应该得到尊重并得到关爱，请让我们一起努力去爱护、保护身边所有的生命，因为生命都是平等的。      ProSci 生物科技公司是我踏上美国土地4个月后的第一份工作，虽然在这里工作不到一年，但是她是我在生物界起飞的摇篮与热土，也是我人生第二次生命中的伯乐。对此永表感恩之心。❤️     在ProSci 公司成立20周年庆之际，非常有幸参加了公司在海上举行的庆祝活动，与各位有恩的朋友再次重逢非常非常的开心！衷心祝愿PrpSci 公司的明天更美好！😊🌹🌹🌈🎊🎂🎂👍About ProSciProSci Incorporated is one of the leading companies in antibody development. A privately-held biotechnology firm, ProSci’s mission is to provide the biotech community and customers with the highest quality single domain, polyclonal and monoclonal antibody services available. Since 1998 customers benefit from ProSci’s expertise in antibody production, immunochemistry services, and biological research. This is the first company I worked after coming to the United States. It gave me the opportunity to learn and work, and I am very grateful for the trust and help of the company.      孤独，是让天地之间唯有自己，再一步步看见自己真正的渴望与热爱。 　　人生中的某一段精彩都是不经意写出。将时光中的苦涩压榨酝酿，流淌于灵魂的笔尖，于是笔尖便盛开了一朵清芬的花。许多人在偶然的一处境地相遇了，然后走着走着就错过了，然后再也找不到对方的身影了。从时光中来的一切，最终都将泯灭在时光里。  每天等我回家的贴心小宝贝。      生命的小舟飘流在汹涌的大海上，面对狂风呼啸怒吼，而它还执着向着远方… ProSci公司成立20周年慶祝活動，我在船上的留影。    这儿就是我在San Diego 的家，虽然一切都显得非常的简单，但简单的生活也是一种幸福。当小息片刻听一首优美的音乐、一支喜爱的歌曲，都会使自己心境开朗。当静静地欣赏自己喜爱的音乐，可以在流荡的旋律中去回忆自己人生中的点点滴滴，或者什么都不去想；一边放送着音乐，一边和🐶宝宝玩耍........ 一杯清茶，或一杯咖啡，放在自己的桌边，而此刻的心情格外的怡然。虽然生活简单就是幸福，但不意味着自己放弃了对人生的追逐，只是在忙碌中的停歇，只是身心疲惫后的调整，因为对我而言，我必须以饱满的精力和旺盛的热情去迎接每一个明天。只是想源于点点滴滴中去积累人生，在平平淡淡中寻求充实和快乐。 　　這是我在SanDiego 时，生活小区附近的小小商业广场。 　　小区的风景，此刻在夕阳的照耀下，仿佛成了画家笔下一张美丽的油画。 　　小区的邻居Hank先生90大寿的生日！他是一位90岁的老人，但身体硬朗，自己开车与生活。他将是我学习的榜样，㊗️朋友生日快乐！🎂 有一天当我们老去时，曾经怦然心动的故事也渐渐睡在了岁月的墙角，当然也会偶然行走出来晒晒太阳，把你的心情喧哗成温热。时光是一条前行的路，时光是一朵勿忘的花，时光是一首回眸的诗。多年后字如初，心如初，那些人是否如初？ 我在这里眺望浩瀚的太平洋将地球一分为二我在山顶，站成了一座灯塔的模样孤独，最适合此时无言的海水里汹涌着远航人日夜的思念和我短暂的惆怅...... 2006年6月26日我離開了ProSci公司，進入eBioscience公司單克隆抗體組工作，技術員。 關於在該公司的工作請您繼續閱讀：春天的回忆/美国篇（ San Diego 2 ) ，謝謝。😊🙏🏻 作者个人简介：Steven Li 美籍华人一代知青1968年12月下放湖北京山縣插队落户，在广阔天地里锻练了2年1970年7月被招工进入武汉锅炉厂1974年8月保送原武汉水利电力学院“ 热工测量及自动化 ”学习武汉锅炉厂设计处/ 自控公司2000年作為高級人才調回上海上海发电设备成套设计研究院自动化所（高级工程师/Senior Engineer ）2005年3月移民美国从事单克隆抗体研究制备（ Hybridoma ) Thermo Fisher SCIENTIFICResearch & Development( 三级科学家/Scientist III）