美篇七：关于新冠核酸检测的小科普

小蛐蛐

身边常常会有人问起关于新冠核酸检测的若干问题：

为什么核酸检测需要好几个小时？

为什么曾报道说有人几次检测都阴性后来突然阳性？

我排队采样的时候与某某人一前一后为什么他的结果出来了我却比他晚？

为什么我这么着急你不能给我这个标本塞进去快点出结果？

为什么新冠核酸阳性了就说这个人被确诊了？

总之，十万个为什么，我希望通过这篇文章能给大家的问题找到一些答案！

提出的问题不仅是以上那些，还有更多更多…

呼吸道病毒感染人体之后，首先会在呼吸道上皮细胞中“扎根”繁殖。因此，上呼吸道标本（鼻咽拭子、咽拭子、痰液以及肺泡灌洗液）检测的阳性率是最高的。由于在感染病毒的初期，病毒可能还没有侵入到患者的血液，此时检测血液中的病毒核酸很可能会是阴性，这样的假阴性结果就会导致漏检。

核酸是地球上几乎所有生物的遗传物质，核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。病毒核酸位于病毒的内部，病毒的外部是由蛋白或者脂蛋白组成的保护型外壳。

核酸能决定病毒的毒性、传播性、变异性等特性，是区分每种病毒最精准的标识。

所以，如果检测到了新型冠状病毒的核酸，就能证明此人被新冠病毒感染。

采样人员需要经过专业的培训的专科护士来完成，采样过程中她们要按照《医疗机构新冠病毒核酸检测工作手册》防控要求做好三级生物安全防护，同时还要做好信息的采集和确认工作。

采样的质量非常重要，否则即使PCR的方法再高大上，如果采集不到需要检测的病毒也就无法保证检测结果的准确性。

别小看了这些红色的采样管。采样后，将拭子放入病毒保存液中，保存液中含有胍盐，胍盐使蛋白质外壳变性，把蛋白质“外衣”给拔了，才能将病毒的核酸释放出来，露出病毒的“真面目”。

同时保存液可保持病毒核酸的活性与完整性，以便于后边继续核酸检测工作。保存液中还含有多种抗生素，这样可以抑制样本中其它细菌和真菌的生长。

保存液的这些“功能”，可以避免在核酸实验室工作的同行们受到各种病原体的感染。

采样管运送到核酸实验室可不是随随便便就启程。要有三层专用包装，运送人员也要做好防护，走医院规定专用的通道，避免污染环境和感染他人。

红色盖子的采样管的三层包装要在生物安全柜里层层打开，直立放在试管架上。虽然这项工作看似简单，但太大的实验室不说，我们这个小实验室一天最多就收到两千多个样本，那么，这项工作做起来就是费力，也费劲！

从此，新型冠状病毒核酸检测正式进入了检验的流程。新冠病毒核酸只是众多病原体核酸检测的其中一项。核酸检测方法广泛应用于病原微生物检测中，作为诊断疾病和监测病毒载量的重要手段。

第一部，核酸的提取。这一步骤对检测的质量至关重要。例如，对核酸纯度、提取效率、精密度等、试验方法等都有相关规范，这样才能把含有病毒的样本准确检测出来。核酸提取过程大概20-40分钟。有人也向我们提出过质疑，不是说最快的才几分钟吗？我个人认为，片面的追求速度，可能就会牺牲检验质量，不过，这纯属个人观点啊。

这是所有做过PCR实验的检验人员再熟悉不过的神器——俗称“加样枪”，学名“移液器”。

每次吸取一个样本需要换一个加样枪头。在这里，必须更改一下“十进制的”思路，整个过程都是“八进制”，类似于计算机系统的“二进制”？

把一定体积的样本依次按照顺序加入到提取板的孔位里。

经过我们的操作和提取设备一顿鼓捣，“咣咣当当”半个多小时，新冠检测的这段路程结束。

尽管有了三台设备，但是我们人员加样速度总是超过了机器的运转速度，其实还是因为样本多，检验科的家人都是“恨活”的人，所以经常是加好样的提取板在设备前排队等候入场。

经过反复的吸附、洗脱后，核酸终于与病毒的蛋白质与细胞碎片说“拜拜”了，“清清白白”地停留在自己应在的位置。

这时，在比较洁净区域的工作人员已经根据标本的例数配制核酸扩增试剂了。他们要遵照事先书写的“SOP文件”把花花绿绿的各种颜色盖子的小瓶中液体按照一定比例把几种试剂混匀。试剂不可以多配制，因为要保持试剂的稳定性。

配制好的试剂按照一定体积和人份分装到八连管中。

每次分装一排，还要看看是否准确加样。这个过程也完全是手工操作。而且，在核酸检测的过程中，一定要动作轻柔，准确到位！

当然，必不可少的混均和离心过程一直伴随试剂配制过程中。

进入新冠核酸检测第二步——核酸的扩增。当他识别到“目标”病毒的“特点”——特异性的片段，马上一前一后“抓捕”，再添加dNTP、Mg2+、Taq酶等原材料，调节不同的温度，历经“变性-退火-延伸”三大步，完成病毒核酸组装。每扩增一次，DNA产量呈指数增长。新冠病毒扩增一般需要40个循环，理论上1个待测基因可以得到2的40次方的数量，即1,099,511,627,776个。即使样本中病毒含量很低，都可以通过PCR扩增检测出来。因此PCR反应有高特异性和高灵敏度的特点。

再一次使用加样神器，把提取好的每个核酸样本加入到对应的核酸扩增试剂的反应孔中。考验人不？！几百个甚至几千个样本，要做到眼不花，手不抖，心不乱，容易吗？

加样后，经过快速离心，把一排排小管管整齐摆放到扩增设备中。牢牢记住，反复用大拇指肚把八连管的塑料盖压紧，压实，否则，一百度的加温要是引起“崩管”，后果就不堪设想了。每日下来，大拇指疼痛加麻木！！

我们再给扩增仪多条指令，它开始“嗷嗷嗷”地就进入工作状态了。这是反复升温～降温～升温…特有的声音。

这个过程是80分钟到120分钟不等。然后分析数据，读取结果。我们特别怕看到待测基因出现图中S型的曲线或者红色的提示或者＜40的某些数字，因为这是阳性结果的标志。不过，大家不用担心，图中的“阳性”是我们每批实验中必须要带的阳性对照，是为了监控每批次的检验质量呢。锦州还没有阳性病例啊！

这是我们工作时的安全防护和负压环境的照片。生物安全防护是为了保证检验人员不被感染；负压环境是为了保证医院环境不被污染。但是可想而知，这样的装备和这样的条件会给我们每个检验人员带来怎样不适的感受，无法用语言形容。为了更好地完成这项工作，我们也是拼了！

到此为止，是不是能回答大家常常思考的并且提出的一些问题了呢？

对了，引用我一个同事给患者“答疑”时的一段“妙语”：

你说，这个位置都已经被前边人占上了，你提要求加塞，你说把谁的标本撇走给你腾地方？

再说了，刚做这一批，即使有空位也不能随便再挤进去标本。这就像蒸馒头，中间不能揭锅，否则就会有夹生的！

你和前边的人仅差一步，他的结果出来了你的结果没出来，就是因为你赶在下一锅里了，懂没？

佩服不？这神回答！

是不是做完实验整个核酸检测工作就结束了？当然没有！我们需要依靠强大的信息系统建立报告单，之后要审核检验结果。有时候，最多每天几千个标本，可能数（鼠）起数（树）来，十进位都会错，不信你来试试？

这样，每个进行核酸检测的人员可以通过纸质版或者电子版的信息得到本人的核酸检测结果。

不知道大家是否思考过，为何在你自己手机的APP上能够查到结果？那是因为每个医疗单位都有幕后工作者每天把海量数据通过指定的方式上传疾控网站，并且严格保密每个人的个人信息。

以下是新冠核酸检测流程图。

如果你需要，我们还提供出境专用的中英文报告。

需要补充的是，核酸检测工作不仅仅是以上的内容和在媒体上展示的林林总总，还有诸多工作是非本专业的人无法知晓的：比如说实验室的质量控制和室间质评；比如说定期对实验室压力、环境、几十种设备器械的检定；比如说实验室内复杂的消毒流程；比如说假阳性的数据分析和判断…都是我们每天不可或缺的严谨而复杂工作过程。

亲爱的小伙伴们，你们是不是和我一样有时有些抓狂？

每天接到的文件40%和疫情防控有关；

学习和培训的内容50%是核酸检测；

电话沟通和微信回复60%与核酸关联；

核酸实验室后半夜下班的几率是70%…

但，职责所在，我们从不推脱责任，从不计较得失！

付出终有回报，我们的工作得到了医院、社会、政府的充分肯定！

继续！加油！

惟有奋斗，方能致远！！