<h1><b><font color="#ed2308"><br></font></b></h1><h1><b><font color="#ed2308">今天是“中国医师节”，首先祝广大微生物同行们节日快乐，工作顺利！</font></b></h1><h3></h3><h3><br></h3> <h1><b><font color="#167efb">最近微生物大讲堂的老师们都听过鲁炳怀老师、时东彦老师等诺卡菌的相关课程，广大微生物同行们对诺卡菌的认识有了新的理解和提高。今天东科老师从形态学入手，手把手教学如何制作漂亮的诺卡菌永久示教片。</font></b></h1><h1><br></h1><h1>咱们先来看几张图片</h1><h3></h3> <h1><b>能想象到图一、二和图三都是诺卡菌的染色形态吗？不同的方法造就了它的差异，想必很少有人见过诺卡菌的原生态生长状况吧，东科老师将带你走进诺卡菌的微观世界。<br></b><b>要想知道原由得先来复习下诺卡菌的相关知识</b></h1> <h3>诺卡菌属（Nocardia）隶属于细菌域，放线菌门，放线菌纲，棒杆菌目，诺卡菌科(Nocardiaceae)。</h3> <h3>诺卡菌在自然界分布广泛，多为腐生寄生菌，与人类疾病关系最大的是星形诺卡菌和巴西诺卡菌，多为外源性感染。星形诺卡菌是一种机会致病菌，主要通过呼吸道入侵肺部，引起化脓性炎症与坏死，症状类似结核病，病灶可向其他组织器官扩散，进而引起脑膜炎、腹膜炎等。星形诺卡菌肺炎患者的痰标本呈肺结核样的干酪痰。巴西诺卡菌可通过损伤的皮肤侵犯皮下组织，产生慢性化脓性肉芽肿，表现为脓肿及多发性瘘管，好发于足和腿部，称为足菌肿（mycetoma）。此外，巴西诺卡菌还可引起蜂窝织炎，皮肤脓肿及皮肤淋巴感染。</h3> <h3>诺卡菌为严格需氧菌。在沙保罗琼脂或普通琼脂培养基上，室温或35℃均可缓慢生长，初代分离常需孵育1周。诺卡菌种与种之间菌落形态存在差异，同一种的不同分离株在不同培养基上或不同的培养时间菌落形态差异很大。可出现光滑到颗粒状、不规则、表面皱褶或堆集的菌落。几乎都能形成气生菌丝，使菌落表面出现粉状或天鹅绒样气生菌丝体，菌落有泥土气味。为避免粉状气生菌丝的干扰，在半透明培养基（如沙保罗琼脂）上生长的菌落最好在培养基反面观察菌落颜色。<b></b></h3> <h1><b>诺卡菌属中与人体感染有关菌种约20个种，种间形态上有些差异不大或有些差异很明显。菌落直接涂片，看不清结构，断裂后形态都一样。只有小培养才能体现诺卡菌的原生态，利用丝状真菌的琼脂块培养法就能模拟诺卡菌90°分枝的原生态生长状态。</b></h1><h3><b><br></b></h3><h1>先将诺卡菌的小培养制作好</h1> <h3>培养一周的诺卡菌菌落</h3> <h3>开始制作示教片，需要准备的材料有:已小培养好的诺卡菌、封片胶、一次性吸管、载玻片、盖玻片、镊子、酒精灯。</h3> <h3>在载玻片上加一滴封片胶</h3> <h3>将培养好的盖玻片(陈老师用的18x18mm)轻轻揭起，背面稍微过火固定下，再把盖玻片背面轻放在封片胶上</h3> <h3>待其固定在载玻片上，一般一天左右可干透</h3> <h3>东科老师的批量制作</h3> <h3>将干透后的玻片进行不同的染色，按正常染色程序进行即可</h3> <h3>待染好色的玻片干后再进行封片。将封片胶滴加在染好色的菌落最中间</h3> <h3>夹起一块稍大的玻片盖在封片胶上(陈老师使用的20x20mm),动作要轻柔不要弄出气泡，这样示教片保存的时间更长久</h3> <h3>将封片的玻片放在平整的地方干透，非常漂亮又原生态的诺卡菌示教片就制作好了</h3> <h3>东科老师不同染色方法批量制作的示教片</h3> <h1><font color="#010101"><b><br></b></font></h1><h1><font color="#010101"><b>学会了吗？是不是很简单呢？如果有疑惑也别担心，陈老师拍了视频来手把手教学，赶紧看起来</b></font></h1><h3><font color="#010101"><b><br></b></font></h3> <h3>染色好后再封片</h3> <h1>再学不会陈老师就要打手板心了哟，赶紧动手做起来吧。<b>要想知道诺卡菌各种之间的形态学差异，请关注东科老师的《实用临床微生物学检验与图谱》第二版，小小地透露下已经在做最后的收尾工作啦👏👏👏</b></h1><h3></h3> <h1><b><font color="#ff8a00"><br></font></b></h1><h1><b><font color="#ff8a00">福利——东科老师制作的诺卡菌示教片欣赏</font></b></h1><h3></h3> <h3>未染色</h3> <h3>革兰染色</h3> <h3>弱抗酸染色</h3> <h3>加一例链霉菌</h3>